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玉米赤霉烯酮免疫親和柱
產(chǎn)品名稱:玉米赤霉烯酮免疫親和柱
產(chǎn)品品牌:HPSW
產(chǎn)品貨號(hào):06994-2530
產(chǎn)品規(guī)格:3ml

概要】
玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)又稱F-2毒素,是玉米赤霉菌的代謝產(chǎn)物,具有雌激素樣作用,具有較強(qiáng)的生殖毒性和致畸作用,可引起動(dòng)物發(fā)生雌激素亢進(jìn)癥,導(dǎo)致動(dòng)物不孕或流產(chǎn),對(duì)家禽、豬、牛和羊的影響較大,給畜牧業(yè)帶來(lái)很大的經(jīng)濟(jì)損失。
 
【適用范圍及性能】
用于定性、定量檢測(cè)谷物、酒類等食品和飼料等樣本中的玉米赤霉烯酮時(shí)的樣品前處理。
柱容量:≥600ng
回收率:≥90%
 
【試驗(yàn)原理】
本產(chǎn)品的測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),玉米赤霉烯酮單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠上,樣品中的玉米赤霉烯酮經(jīng)過(guò)提取、過(guò)濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢的通過(guò)玉米赤霉烯酮免疫親和層析柱,在免疫親和柱內(nèi),玉米赤霉烯酮與抗體結(jié)合,之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結(jié)合的其他物質(zhì)。用甲醇洗脫玉米赤霉烯酮,然后注入到分析儀器中用于檢測(cè)。
 
【包裝組成】
25支/盒,3mL柱管/支
產(chǎn)品說(shuō)明書1份
 
【需要而未提供的設(shè)備及試劑】
設(shè)備:
┅┅高速均質(zhì)器或組織勻漿機(jī)
┅┅粉碎機(jī)
┅┅200ml/50ml量筒
┅┅天平:感量0.1g
┅┅微量移液器:?jiǎn)蔚?nbsp;100ml~1000ml
┅┅槽紋濾紙(折疊快速定性或定量濾紙)
┅┅玻璃微纖維濾紙(1.5mm孔徑)
┅┅50ml漏斗
┅┅一次性玻璃試管
┅┅泵流操作架(包括空氣泵,不同容積的玻璃注射器等)
試劑
┅┅甲醇(色譜級(jí))
┅┅蒸餾水或去離子水
┅┅pH7.0磷酸鹽緩沖溶液(PBS緩沖液):稱取8.0g氯化鈉,1.2g磷酸氫二鈉,0.2g磷酸二氫鉀,0.2g氯化鉀,用990mL純水溶解,然后用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.0,最后用純水稀釋至1000mL
 
【試劑配制】
樣品提取液:配制甲醇-水(8:2)溶液作為樣品提取液
 
【樣本處理步驟】
(一)花生,玉米,大米,小麥及其制品和飼料
┅┅稱取50g粉碎的樣品于100mL容量瓶中,加入5.0g氯化鈉,以樣品提取液定容。
┅┅轉(zhuǎn)移至均質(zhì)杯中,在均質(zhì)器上高速攪拌,提取2分鐘;
┅┅4000r/min離心5min或用定量濾紙過(guò)濾
┅┅取10mL濾液并加入40mLPBS緩沖液稀釋,用玻璃微纖維濾紙過(guò)濾,取過(guò)濾后液體待測(cè);
┅┅將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;
┅┅將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約1滴/S的流速緩慢通過(guò)免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過(guò)柱體;
┅┅以10.0mL的PBS溶液和去離子水依次淋洗柱子1次,流速約為1滴-2滴/S,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過(guò)柱體;
┅┅準(zhǔn)確加入1.0mL色譜級(jí)甲醇洗脫,流速為1 滴/S,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測(cè)用。
 
(二)啤酒,黃酒等酒類
┅┅取10mL試樣脫氣后與90mLPBS緩沖液混勻,用玻璃微纖維濾紙過(guò)濾,取過(guò)濾后液體待測(cè);
┅┅將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;
┅┅將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約1滴/S的流速緩慢通過(guò)免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過(guò)柱體;
┅┅以10.0mL的PBS溶液和去離子水依次淋洗柱子1次,流速約為1滴-2滴/S,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過(guò)柱體;
┅┅準(zhǔn)確加入1.0mL色譜級(jí)甲醇洗脫,流速為1 滴/S,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測(cè)用。
 
【結(jié)果判定】
經(jīng)免疫親和柱凈化后,收集到的甲醇洗脫液可直接使用熒光計(jì)或者HPLC檢測(cè),也可使用薄層色譜或者酶聯(lián)免疫試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。收集到的1ml洗脫液中的玉米赤霉烯酮含量相當(dāng)于1g樣品中玉米赤霉烯酮含量。
 
【注意事項(xiàng)】
┅┅玉米赤霉烯酮危害很大,應(yīng)戴手套操作。
┅┅不要使用過(guò)了有效日期的免疫親和柱。
 
【貯藏條件及保存期】
貯藏條件:親和柱可于常溫保存,2-8℃儲(chǔ)存可延長(zhǎng)有效期,不可凍存
保存期:該產(chǎn)品有效期為12個(gè)月。
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